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垂直電泳槽染色與脫色注意

更新時間:2020-05-12點擊次數:1308
  垂直電泳槽是一種與圓盤電泳槽在原理與結構上略有相似,卻在製膠和電泳方麵存在某些差異的電泳槽種類中的一種。它一般被應用於分子生物學等領域。由於垂直電泳槽在使用過程中的要求較高,所以在使用時應當注意以下幾點:
  分離膠濃度的選擇。低濃度膠對大分子量蛋白質分離效果好:高濃度膠對小分子量蛋白質分離效果好;
  清洗玻璃板。玻璃板應清洗幹淨,玻璃表麵的油汙會造成分離膠與濃縮膠界麵的不平整。經用去汙劑洗滌後的玻璃板先用蒸餾水衝洗,再用紗布蘸乙醇擦拭玻璃表麵;
  TEMED的加入量。TEMED是促進丙烯酰胺聚合的加速劑。加*果隨試劑保存時間而變化。對於陳舊試劑,可適當多加。事實上,配製分離膠時每塊膠板按2滴加入,效果也不錯;
  丙烯酰胺的毒性。丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺都是神經性毒劑,對皮膚有刺激作用。但在形成凝膠後則無毒。操作時應戴橡膠或塑料手套,盡量避免接觸皮膚,並注意實驗後洗手;
  電極緩衝液的配製。電極緩衝液的用量大、占體積、配製麻煩。如果經常跑膠,可考慮配製5X濃度的濃縮液。方法如下:將144g甘氨酸和30﹒2gTris溶於1升蒸餾水中。使用時稀釋5倍。
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